微生物質(zhì)譜鑒定奶粉中的致病菌
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事件背景
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據(jù)新華社報道2022年2月22日報道，海關(guān)總署日前發(fā)布公告，提醒消費(fèi)者“暫不通過任何渠道購買”以及“立即暫停食用”美國某公司旗下相關(guān)嬰幼兒產(chǎn)品。
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公告顯示，2月18日，美國食品和藥品監(jiān)督管理局（FDA）宣布，正在調(diào)查四名嬰兒感染克羅諾桿菌和沙門氏菌事件的投訴?！八信c這些投訴有關(guān)的四例病例都住院治療了，其中一例可能因克羅諾桿菌導(dǎo)致了死亡?！彼拿麐雰壕秤昧嗣绹彻驹诿苄菟固丶构S生產(chǎn)的奶粉。
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該事件在網(wǎng)絡(luò)上一時引起渲染大波。
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認(rèn)識克羅諾桿菌和沙門氏桿菌
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克羅諾桿菌屬(阪崎腸桿菌)因產(chǎn)生黃色素，最初被稱為“黃色陰溝腸桿菌”，1980年更名為“阪崎腸桿菌”，2008年擴(kuò)大為克羅諾桿菌屬。其名字來源于希臘神話中的巨神克羅諾，傳說他的每個孩子一出生就被他一口吃掉，代表該菌對嬰幼兒的致病特性。該菌耐高滲透壓、抗干燥、對溫度的抗性比大多數(shù)革蘭氏陰性菌強(qiáng)，這是它不同于其他食源性致病菌的重要特征。據(jù)了解，克羅諾桿菌又名阪崎克羅諾桿菌，它可以引起發(fā)燒，喂養(yǎng)不良，過度哭泣或低能量以及其他嚴(yán)重的癥狀，甚至引起嚴(yán)重的侵入性感染和嬰兒早死。
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沙門氏菌是屬于腸桿菌科的一種細(xì)菌，是沙門氏菌病的病原體。沙門氏菌能引發(fā)多種疾病而且傳染能力較強(qiáng)，如蛋，家禽和肉類產(chǎn)品都是沙門氏君的傳染媒介。而且人食用攜帶沙門氏菌的人或帶菌者的糞便污染的食物可以使人發(fā)生食物中毒、腸胃炎。其中沙門氏菌引起的食物中毒最為普遍。這種細(xì)菌能能導(dǎo)致感染這種細(xì)菌的人和動物生病甚至死亡。據(jù)了解，沙門氏菌能引發(fā)多種疾病而且傳染能力較強(qiáng)，如蛋，家禽和肉類產(chǎn)品都是沙門氏君的傳染媒介。而且人食用攜帶沙門氏菌的人或帶菌者的糞便污染的食物可以使人發(fā)生食物中毒、腸胃炎。其中沙門氏菌引起的食物中毒最為普遍。這種細(xì)菌能能導(dǎo)致感染這種細(xì)菌的人和動物生病甚至死亡。
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奶粉中微生物檢測相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)
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2010年3月，由衛(wèi)健委（原衛(wèi)生局）發(fā)布，我國現(xiàn)行檢驗標(biāo)準(zhǔn)GB4789.18-2010《食品安全標(biāo)準(zhǔn)——食品微生物學(xué)檢驗乳與乳制品檢驗》。
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2005年10月，由中國檢驗檢疫科學(xué)研究院和天津出入境檢驗檢疫局（天津海關(guān)）牽頭完成的《奶粉中阪崎腸桿菌檢測方法》行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)實施，解決了中國檢測嬰幼兒配方奶粉中阪崎克羅諾桿菌無標(biāo)準(zhǔn)、無檢測方法的問題。
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2011年4月開始實施的國家標(biāo)準(zhǔn)《GB10765-2010 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)嬰兒配方食品》中，要求針對6個月以下的嬰兒配方奶粉進(jìn)行抽樣時，每批次奶粉共抽檢3個樣品，每個樣品100克，不得檢出阪崎克羅諾桿菌。歐盟委員會和美國FDA相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)要求是每批次抽檢30個樣品，每個樣品不超過10克，阪崎克羅諾桿菌不得檢出。
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微生物限量嬰兒配方食品國家標(biāo)準(zhǔn)及對微生物檢測的要求
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MALDI-TOF MS快速檢測微生物
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傳統(tǒng)的微生物鑒定方法有生化反應(yīng)，基因測序，免疫學(xué)方法等，但耗時都比較長?；贛ALDI-TOF的微生物鑒定系統(tǒng)，樣品培養(yǎng)好后幾分鐘即可出鑒定結(jié)果，比傳統(tǒng)方法更快捷，日常使用試劑耗材成本更低，通量更高。
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由融智生物自主研發(fā)的QuanID —— 新一代寬譜定量飛行時間質(zhì)譜全自動臨床微生物質(zhì)譜檢測系統(tǒng)，對MALDI-TOF MS革命性的改進(jìn)，體現(xiàn)于對微生物鑒定的更高效率、更準(zhǔn)確（重現(xiàn)性）以及更完整的微生物核糖體蛋白指紋圖譜庫。
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QuanID采用了微生物基因組學(xué)、蛋白組學(xué)和生物信息學(xué)相結(jié)合的獨(dú)特建庫方法，這種建庫方法對建庫的蛋白進(jìn)行了針對性的選擇，數(shù)據(jù)更可靠，不受細(xì)菌培養(yǎng)條件影響。同時，支持?jǐn)?shù)據(jù)庫升級，可檢克羅諾桿菌和沙門氏桿菌在內(nèi)的包
括超過1800個菌屬，6600個菌種，覆蓋各類臨床常見微生物，獨(dú)有的二級數(shù)據(jù)庫，可有效區(qū)分基因型相似的難分辨菌。
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融智生物與某疾控中心合作，使用QuanID采集的質(zhì)譜圖
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近年來，微生物質(zhì)譜系統(tǒng)已廣泛應(yīng)用在我國主要的醫(yī)療機(jī)構(gòu)、疾病控制、高?？蒲幸约俺鋈刖硻z驗檢疫等領(lǐng)域。
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除了得益于超大的數(shù)據(jù)庫外，質(zhì)譜硬件的性能也是鑒定準(zhǔn)確性的保證。QuanID微生物質(zhì)譜系統(tǒng)依托于融智生物新一代寬譜定量飛行時間質(zhì)譜平臺QuanTOF（新一代的MALDI-TOF MS），檢測質(zhì)量范圍更寬（10-1000,000Da），重現(xiàn)性更高（SD＜5%），保證了微生物鑒定結(jié)果的高準(zhǔn)確性。
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此外，QuanID微生物質(zhì)譜系統(tǒng)的數(shù)據(jù)庫還有一個獨(dú)特之處，就是分為一級、二級兩個數(shù)據(jù)庫，二級菌庫涵蓋100多種相似病原體，可對基因型相近的難分辨微生物（如：大腸桿菌和志賀氏菌等）做出準(zhǔn)確鑒定。
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MALDI-TOF MS鑒定細(xì)菌基本流程是，將細(xì)菌純培養(yǎng)后，點靶加釋放液，細(xì)菌經(jīng)過釋放液充分處理后，可使得細(xì)胞內(nèi)的蛋白成分更好地釋放出來，待溶劑揮發(fā)后加基質(zhì)，蛋白分子與基質(zhì)形成基質(zhì)結(jié)晶，上質(zhì)譜檢測。在質(zhì)譜儀中，樣品通過有效的電離將不同質(zhì)荷比（m/z）的離子分開形成細(xì)菌特異性的清晰的指紋圖譜，通過分析關(guān)鍵的質(zhì)譜峰數(shù)據(jù)，與數(shù)據(jù)庫中的已知菌種譜圖進(jìn)行比對，即可快速得到細(xì)菌鑒定結(jié)果。
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